انتاج وتنقية وتوصيف انزيم الفايتيز من الاجسام الثمرية لعزلة محلية من الفطر البازيدي Pleurotus ostreatus (11L) واختبار تاثيره في بعض المتغيرات البايولوجية في الجرذان البيض

الملخص

اظهرت العزلة المحلية للفطر Pleurotus ostreatus (11L) من بين عشرة انواع من الفطريات تفوقها بانتاج الفايتيز الداخل خلوي اذ بلغت الفعالية الانزيمية 0.66 وحدة/مل مقارنة بمدى 0.16-0.61 وحدة/مل للفطريات الاخرى. درست الظروف المثلى لانتاج اعلى فعالية انزيمية من الفطر P.ostreatus (11L)، ابدى وسط تبن الحنطة اعلى انتاجية للفطر(كفاءة احيائية) واعلى فعالية انزيمية للاجسام الثمرية النامية فيه اذ بلغت 71.07% و 0.63 وحدة/مل، على التوالي. وسجل معدل اللقاح الفطري عند 4 و5% اعلى فعالية انزيمية بلغت لكليهما 0.68 وحدة/مل فيما كانت الدرجة الحرارية 17 ⁰م المثلى لنمو ثمار الفطر وتسجيلها لاعلى فعالية انزيمية بلغت 0.71 وحدة/مل ثم انخفضت الى 0.57 و0.51 وحدة/مل عند درجتي 21 و23م على التوالي. ، فضلا عن تلك الظروف فقد ارتفعت الفعالية الانزيمية الى 0.88 وحدة/مل عند حصاد الاجسام الثمرية عند مرحلة النضج (بعد 8 ايام من مرحلة التبرعم). اجريت تنقية الفايتيز من الفطر P.ostreatus (11L) بثلاث خطوات شملت الترسيب بملح كبريتات الامونيوم (نسبة الاشباع 70%) وفيها ارتفعت الفعالية النوعية من 0.38 وحدة/ملغم بروتين في المستخلص الخام الى 0.77 وحدة/ ملغم بروتين بعدد مرات التنقية 2.03 مرة وبحصيلة انزيمية 92.05% ، وعند خطوة كروماتوغرافيا التبادل الايوني باستخدام DEAE-cellulose بلغت الفعالية النوعية 3.6 وحدة/ملغم بروتين بعدد مرات التنقية 9.47 مرة وبحصيلة انزيمية 71.82% وفي اخر خطوة باستخدام كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام الهلام Sephadex G 75 وصلت اعلى فعالية نوعية عند 7.5 وحدة/ ملغم بروتين بعدد مرات التنقية 19.74 مرة وبحصيلة انزيمية 68.18%, اظهرت نتائج الترحيل الكهربائي باستخدام هلام الاكريل امايد المتعدد وجود حزمة بروتينية واحدة دليل على نقاوة الانزيم، بلغ الوزن الجزيئي للفايتيز المنقى 25.12 كيلودالتون.  درس تأثيرالفايتيز المنقى من الفطر P.ostreatus (11L) مقارنة مع مصادر اخرى اذ شملت الفايتيز التجاري والاجسام الثمرية والوسط المستنفذ (بعد حصاد الاجسام الثمرية) في بعض معايير النمو في اناث الجرذان، واظهرت النتائج تسجيل اعلى مؤشرات النمو في معاملات الانزيم المنقى والانزيم التجاري مقارنة بالمعاملات الاخرى وبالسيطرة ولم يسجل اي فقدان في الوزن واي هلاكات في جميع معاملات التجربة, بين معاملات الانزيمات، سجلت اعلى زيادة وزنية واعلى معدل النمو اليومي في معاملة الانزيم المنقى عند التركيز 0.03% اذ بلغت 17.4 غم و 0.5 غم/يوم،على التوالي ، ، فضلا عن ادنى مستويات انزيمي AST و ALT سجلت في معاملات الانزيم المنقى والتجاري. واظهرت جميع تراكيز الانزيم المنقى والانزيم التجاري زيادة معنوية في معادن الدم التي شملت الفسفور والبوتاسيوم والمغنيسيوم والكالسيوم والحديد والكلور والصوديوم بينما سجلت ادنى تلك المعادن في براز الجرذان لتلك المعاملات.

https://doi.org/10.24897/acn.64.68.169